2021年8月《药物设计、开发及疗法》期刊发表了文章银杏酮酯联合阿司匹林协同抗血小板作用研究。

文章摘要

银杏酮酯联合阿司匹林协同抗血小板作用研究

目的: 通过体外模型研究银杏酮酯(GBE50)与阿司匹林联合应用的协同抗血小板作用。

方法: 以花生四烯酸(AA)、血小板活化因子(PAF)、二磷酸腺苷(ADP)和胶原蛋白为诱导物。利用兔血制备贫血小板血浆和富血小板血浆，检测 GBE50 （0.01 mg/ml-3 mg/ml）、阿司匹林（0.01 mg/ml-3 mg/ml）及GBE50 与阿司匹林 1:1（0.01 mg/ml-3 mg/ml）联用的抗血小板作用。采用 Synergy finder 分析 GBE50 与阿司匹林是否有协同抗血小板作用。通过UPLC-Q/TOF-MS分析鉴定 GBE50 中的化学成分，并通过 TCMSP 数据库筛选活性化合物。银杏酮酯活性成分和阿司匹林的靶点均在 TCMSP、CCGs、Swiss target prediction 及 DrugBank 等数据库中获得。涉及血小板聚集的相关靶点从GenCLiP数据库中获取。构建化合物-血小板聚集靶点网络，进行GO和KEGG富集分析，以识别银杏酮酯和阿司匹林联合抗血小板作用关键的生物过程和信号通路。采用ELISA法检测在体外模型中检测银杏酮酯和阿司匹林单独应用及二者 1：1 联合给药后血栓素B2 (TXB2)、环磷酸腺苷(cAMP)和PAF受体(PAFR)水平，以确定 GBE50、阿司匹林及其联合用药对上述通路的影响。

药物联合协同图。
注:AA (A)、PAF (B)、ADP (C)、胶原蛋白(D)诱导血小板聚集的联合用药相互作用分析。联合用药为0.01 mg/mL GBE50 + 0.01 mg/mL阿司匹林、0.03 mg/mL GBE50 + 0.03 mg/mL阿司匹林、0.1 mg/mL GBE50 + 0.1 mg/mL阿司匹林、0.3 mg/mL GBE50 + 0.3 mg/mL阿司匹林、1mg /mL GBE50 + 1mg /mL阿司匹林和3mg /mL GBE50 + 3mg /mL阿司匹林。结果为三个独立实验的均值±S.E.M.。在图中，协同和拮抗剂量区域用红色和绿色突出显示。

结果: 与银杏酮酯或阿司匹林单独应用相比，二者 1：1 联合应用对 AA、ADP、PAF 和胶原诱导的血小板聚集都有很强的抑制作用，联合应用半抑制浓度（IC50）分别为：0.067 mg/ml、 1.474 mg/ml、0.2886 mg/ml 和 0.149 mg/ml。协同分析显示，在 AA 诱导的血小板聚集中，银杏酮酯联合阿司匹林可发挥协同抗血小板作用，而在 ADP、PAF 和胶原诱导的血小板聚集中发挥相加抗血小板作用。经成分鉴定及活性筛选后，银杏酮酯中有7个成分被认定为潜在的抗血小板活性成分。成分-靶点网络图及富集分析表明，银杏酮酯主要通过 cAMP 通路、AA 代谢及钙离子信号调节血小板聚集。阿司匹林主要通过 AA 代谢及血小板活化通路调节血小板聚集。ELISA 实验表明银杏酮酯联合阿司匹林可以显著增加血小板内 cAMP 水平，降低 TXB2 和 PAFR 的水平。
结论: GBE50 联合阿司匹林可增强抗血小板作用。它们在抑制血小板聚集方面具有协同和加强作用。其机制可能与增加血小板 cAMP 水平，降低 TXB2 和 PAFR 水平有关。该研究阐述了银杏酮酯（GBE50）作为治疗血栓相关疾病的应用价值。
关键词:银杏叶，阿司匹林，抗血小板，协同作用，中草药，花生四烯酸

全文为The Synergistic Effect of Ginkgo biloba Extract 50 and Aspirin Against Platelet Aggregation.Drug Design, Development and Therapy 2021:15 3543–3560.